Konfokale Reflexionsmikroskopie

Was ist konfokales Reflexionsvermögen? Mikroskopie?

Im Dermatologiekonfokale Reflexionsmikroskopie (RCM) nichtangreifend Bildgebungstechnik, die eine In-vivo-Visualisierung der Epidermis bis zur Papillare Dermis in Echtzeit. Die Auflösung ist fast vergleichbar mit der herkömmlichen Histologie. Es hat den Vorteil, dass der Kliniker eine "virtuelle" durchführen kann BiopsieVon der Haut und erhalten Sie diagnostische Hinweise, während Sie unnötige Haut minimieren Biopsien.

Das Konfokale Mikroskop wurde Mitte der 1950er Jahre von Professor Marvin Minsky erfunden. RCM in der Hautbildgebung wurde später 1995 von Dr. Rajadhyaksha und seinen Kollegen beschrieben. Seitdem besteht großes Interesse an der Verwendung dieser Technik in der Diagnose. von malignen Neubildungen der Haut wie Melanom und in entzündlich Hautzustände.

Wie funktioniert die konfokale Reflexionsmikroskopie?

RCM verwendet die Diode Sein als kohärente, monochromatische Lichtquelle.

• Licht tritt durch einen Strahlteiler, eine optische Scan- und Fokuslinse und eine Hautkontaktvorrichtung.
• Es dringt in die Haut ein und beleuchtet ein kleines Stück Gewebe.
• Licht reflektiert von der Schwerpunkt Der Punkt wird durch die Linse reflektiert, die ihn in ein kleines Loch fokussiert und ein Bild auf einem Fotodetektor erzeugt.
• Die Lochblende lässt nur Licht von einem Brennpunkt durch (dh es ist konfokal) und verhindert Licht von einer anderen nicht fokussierten Ebene oder einem anderen Gewebepunkt.

RCM basiert auf dem Reflexionsvermögen (Rückstreuung) von Licht von Strukturen mit endogen Kontrast, wie Melanin, Hämoglobin und etwas Organellen. Das Reflexionsvermögen tritt an den Grenzen zweier Strukturen mit unterschiedlichen Brechungsindizes auf, wie Membranen, Keratohyalin Granulat und Melanosomen.

Das im Handel erhältliche Vivascope® 1500 verwendet einen 830-nm-Laser, da diese Wellenlänge keine Gewebeschäden für den Patienten oder die Augen des Bedieners verursacht. Die Eindringtiefe beträgt 200 bis 300 µm, was in der Regel dem entspricht papilläre Dermis oder höher retikulieren Dermis.

Wie wird die konfokale Reflexionsmikroskopie eingesetzt?

RCM ist ein schmerzloses Verfahren.

• Eine kleine Menge Immersionsöl wird auf die Haut aufgetragen (der Brechungsindex des Öls liegt nahe an dem des Stratum corneum).
• Ein Glasfenster wird an einem Metallring befestigt und über das Öl gelegt.
• Das Glasfenster wird mit medizinischem Klebeband an der Haut befestigt, um eine Bewegung der Haut zu verhindern.
• Ein Tauchmedium auf Wasserbasis, beispielsweise auf Wasserbasis oder auf Wasserbasis Gelbefindet sich innerhalb des Rings, der magnetisch am Gehäuse der optischen Linse des Mikroskops angebracht ist.

RCM ermöglicht das horizontale Scannen des Bildgewebes in einer vorgewählten Tiefe.

• Jedes erzeugte Grundbild ist 5 mm x 5 mm groß. Alles Verletzungen Bilder bis zu 8 mm x 8 mm können erzeugt werden.
• Die Grundbilder werden von einem Computer zu einem Block oder Mosaik zusammengefügt.
• Eine vertikale Reihe von Bildern kann an derselben horizontalen Position erhalten werden und wird als Stapel bezeichnet.
• Ein Würfel ist ein Stapel von Blöcken / Kacheln.

Das RCM-Gerät verfügt über ein Zubehör für Dermatoskop. Dies erlaubt dermoskopisch-Korrelation der konfokalen Mikroskopie. Video von kapillar Der Blutfluss kann auch gefilmt werden.

Was sind die möglichen klinischen Anwendungen der konfokalen Reflexionsmikroskopie?

RCM kann zur Diagnose verwendet werden gutartig und der Böse Hautläsionen wie:

• Besonders Melanom Lentigo maligne
• Basal Zelle Karzinom
• Schuppig Zellkarzinom

RCM kann zur Überwachung der Behandlung verwendet werden, z.

• Wirksamkeit von Imiquimod in aktinisch Keratose
• Bewerten Sie geeignete Operationsränder ex vivo in der Mohs-Chirurgie

Eine Konsensgruppe stellte fest, dass die besten Indikationen für die Verwendung von RCM (Januar 2017) sind:

• Lokalisierte Kopf- und Nackenverletzungen, beschädigt durch chronisch Sonnenaussetzung
• Läsionen dermoskopisch typisiert durch Regression
• Amelanotisch Tumoren

RCM kann auch zur Diagnose von Entzündungszuständen verwendet werden, wie z.

• Schuppenflechte
• Dermatitis/Ekzem
• Befall, zum Beispiel Krätze.

Welche Merkmale können bei normaler Haut mit RCM festgestellt werden?

Stratum corneum

• das geiler Umhang Es ist eine hochbrechende (glänzende) Oberfläche, die von sichtbaren Hautfalten umgeben ist (diese sind dunkel).
• Korneozyten sind groß (10–30 µm), polygonal und ohne sichtbare Ader.

Körnige Schicht

• Keratinozyten beim körnig Zellschicht hat gutabgegrenzt Konturen, die ein Wabenmuster bilden.
• das Zytoplasma erscheint aufgrund von Organellen und Keratohyalin-Granulat weiß und körnig.

Dornschicht

• Keratinozyten in der Plattenepithelzellen Die Schichten sind kleiner (15-25 um), polygonal, haben ein dünnes weißes Zytoplasma und ein dunkles Oval Kerne.
• Sie bilden auch ein Wabenmuster.

Grundschicht

• Basalzellen sind klein (7–12 µm), gleichmäßig in Form und Größe und erscheinen aufgrund des Vorhandenseins von Melaninschichten über ihren Kernen heller.
• Melanozyten und pigmentiert Keratinozyten erscheinen als einzelne runde / ovale Strukturen und sind nicht zu unterscheiden.
• In den Hautphototypen II bis IV bilden basale Keratinozyten Cluster runder Zellen mit hochbrechenden Keratinozyten und zeigen in den oberen konfokalen Abschnitten ein Kopfsteinpflaster.

Dermo-epidermal Kreuzung (DEJ)

• In DEFJ bilden kleine Basalzellen und Melanozyten helle Ringe, die die Dunkelheit umgeben. dermal Papillen
• Innerhalb dieser kleinen Schleifen von Blutkapillaren mit Blutgefäße Wurden gesehen.
• Diese Anordnung wird als Grenze bezeichnet Papille”.

Dermis

• Die Blutgefäße der Dermis erscheinen als dunkle röhrenförmige Strukturen, die schwache und glänzende refraktive Zellen enthalten.
• Kollagen Die Fasern erscheinen als längliche und glänzende fibrilläre Strukturen.

RCM-Eigenschaften von Hautläsionen

Melanom

Das frühe Melanom ist gekennzeichnet durch:

• Änderung des DEJ, die abflacht und unübersichtlich wird
• Schlecht definierte papilläre Konturen ("randlose" Papille)
• Haferbrei im Wechsel mit einzelligen Proliferationen und Nester von atypisch Zellen, um ein "unspezifisches" Muster zu bilden.
• Hautpapillen, die durch atypische Zellen ersetzt werden.

Die Merkmale des am weitesten fortgeschrittenen Melanoms sind:

• Bösartige Zellen, die den gesamten Übergang einnehmen.
• Lose, große, glänzende Zellen in der Epidermis
• Große, glänzende Zellen mit dunklen exzentrischen Kernen in der oberflächlichen Epidermis (Pagetoid Ausbreitung)
• Cerebriforme Nester in knotig Melanom

Melanozytisch nevi

• Meist ist ein Maschenmuster vorhanden, das der Bindungskomponente entspricht.
• Die Befestigungsnester erscheinen als gut abgegrenzte, abgerundete Strukturen, die manchmal mit der Epidermis verbunden sind.
• Im zusammengesetzte Nävi, ein Klumpen Ein Muster wird beobachtet und entspricht oberflächlichen dermalen Nestern von Melanozyten.

Gutartige Keratose

• Eine gutartige Keratose wird verwendet, um einen solaren Lentigo zu beschreiben, a seborrhoisch Keratose, eine Lichen planus-ähnliche Keratose oder eine Kombination davon.
• Am dermoepidermalen Übergang nimmt die Dichte der von einem hellen Licht umgebenen dermalen Papillen zu monomorph Zellschicht.

Anerkennung. Dr. Manu Jain.

Abbildung 1. RCM-Bild einer gutartigen Keratose an der dermoepidermalen Verbindungsrunde zu polymorph scharfe Papillen, umgeben von einem glänzenden Rand monomorph Zellen (Pfeilspitze) und eine Hornhaut Pseudozyste (Pfeil).

Figur 2. RCM-Bild von a gutartige Keratose beim suprabasal Ein Teil der Epidermis zeigt ein Kopfsteinpflaster: helle runde Zellen, dicht beieinander, von einheitlicher Größe und Helligkeit, getrennt durch einen weniger brechenden polygonalen Umriss.

Basalzellkarzinom

Die Merkmale des Basalzellkarzinoms (BCC) sind:

• Kompakte Zellen mit peripher Palisade.
• das gruppiert Zellen werden durch einen dunklen Raum begrenzt
• Sie sind oft von markanten Blutgefäßen umgeben.

Plattenepithelkarzinom

Die Merkmale des Plattenepithelkarzinoms (SCC) sind:

• Variable Keratinozyten Atypie.
• Atypisches Wabenmuster und architektonische Störung in unterschiedlichem Ausmaß innerhalb der körnigen und stacheligen Schicht
• Runde Blutgefäße, die senkrecht zur Hautoberfläche durch die Hautpapillen verlaufen Rahmen–Kortex auf der Oberfläche der Haut

RCM-Eigenschaften von entzündlichen Erkrankungen

Entzündungskrankheiten können in 4 Hauptkategorien eingeteilt werden.

• Spongiotisch Dermatitis
• Psoriasiform Krankheiten
• Krankheiten mit Schnittstellenänderungen
• Pigment andere Störungen als Tumoren

Schuppenflechte

Chronikmerkmale Nummernschild Psoriasis sind:

• Papille nicht an der dermoepidermalen Kreuzung begrenzt. Die Papillen sind eher von schwachen Ringen basaler Keratinozyten als von hellen Ringen umgeben.
• Epidermale Verdickung
• Mehrere Gefäße in randlosen Papillen

Spongiotische Dermatitis

Spongiotische Dermatitis ist gekennzeichnet durch:

• Interzellulär und intrazellulär Die Ansammlung von Flüssigkeit führt zu einem regelmäßigen Auftreten von Waben.
• Spongiotisch Vesikel erscheinen als dunkle Hohlräume zwischen der körnigen und der stacheligen Schicht
• Exozytose sieht aus wie runde, glänzende Zellen zwischen Keratinozyten, um Blutgefäße und Anhänge Strukturen und in der Dermis.

Einschränkungen von RCM

In dem im Handel erhältlichen konfokalen Mikroskop beträgt die Bildtiefe 200 bis 300 um, was der papillären Dermis entspricht. Daher können Läsionen oder entzündliche Prozesse, die tiefer liegen, nicht bewertet werden.

Weitere Einschränkungen sind:

• Gutartiges Spitzoid kann nicht unterschieden werden Verletzung Melanom in den meisten Fällen.
• Läsionen mit reichlicher Abschuppung können die Visualisierung des dermoepidermalen Übergangs verändern.
• Die Interpretation von Bildern erfordert umfangreiche Schulungen.
• Das Instrument kann sperrig und an kleinen konkaven Stellen wie dem Ohr und dem Innenkamm schwer zu platzieren sein.