Microscopía confocal de reflectancia

¿Qué es la reflectancia confocal? microscopía?

En dermatología, la microscopía confocal de reflectancia (RCM) no esinvasor técnica de imagen que permite la visualización in vivo de la epidermis hasta el papilar dermis en tiempo real. La resolución es casi comparable a la convencional histología. Tiene la ventaja de permitirle al clínico realizar una «virtual biopsia”De la piel y obtener pistas de diagnóstico mientras minimiza la piel innecesaria biopsias.

El confocal microscopio fue inventado por el profesor Marvin Minsky a mediados de la década de 1950. La RCM en imágenes de piel fue descrita más tarde por el Dr. Rajadhyaksha y sus colegas en 1995. Desde entonces, ha habido mucho interés en utilizar esta técnica en el diagnóstico de neoplasias malignas de la piel como melanoma y en inflamatorio condiciones de la piel.

¿Cómo funciona la microscopía confocal de reflectancia?

RCM usa el diodo láser como fuente de luz monocromática y coherente.

• La luz pasa a través de un divisor de haz, una lente óptica de escaneo y enfoque y un dispositivo de contacto con la piel.
• Penetra en la piel e ilumina una pequeña mancha de tejido.
• Luz reflejada por el focal El punto se refleja a través de la lente, que lo enfoca en un pequeño orificio y forma una imagen en un fotodetector.
• El agujero de alfiler solo permite que pase la luz de un punto focal (es decir, es confocal) y evita que pase la luz de otro punto de tejido o plano desenfocado.

RCM se basa en la reflectancia (retrodispersión) de la luz de estructuras con endógeno contraste, como melanina, hemoglobina y algo orgánulos. La reflectancia ocurre en los límites de dos estructuras con diferentes índices de refracción, como membranas, queratohialina gránulos y melanosomas.

El Vivascope® 1500 disponible en el mercado utiliza un láser de 830 nm, ya que esta longitud de onda no causa daño tisular al paciente ni a los ojos del operador. La profundidad de penetración es de 200 a 300 µm, que generalmente corresponde a la dermis papilar o superior reticular dermis.

¿Cómo se utiliza la microscopía confocal de reflectancia?

RCM es un procedimiento indoloro.

• Se aplica una pequeña cantidad de aceite de inmersión a la piel (el índice de refracción del aceite es cercano al del estrato córneo).
• Se une una ventana de vidrio a un anillo de metal y se coloca sobre el aceite.
• La ventana de vidrio se fija a la piel con cinta adhesiva médica para evitar el movimiento de la piel.
• Un medio de inmersión a base de agua, por ejemplo, agua o a base de agua gel, se coloca dentro del anillo, que está unido magnéticamente a la carcasa de la lente óptica del microscopio.

RCM permite el escaneo horizontal del tejido de la imagen a una profundidad preseleccionada.

• Cada imagen básica generada es de 5 mm x 5 mm. Todo lesiones se pueden generar imágenes de hasta 8 mm x 8 mm.
• Las imágenes básicas son unidas por una computadora formando un bloque o mosaico.
• Se puede obtener una serie vertical de imágenes en la misma posición horizontal y se denomina pila.
• Un cubo es una pila de bloques / mosaicos.

El dispositivo RCM tiene un accesorio para dermatoscopio. Esto permite dermatoscópico-correlación de microscopía confocal. Video de capilar también se puede filmar el flujo sanguíneo.

¿Cuáles son las posibles aplicaciones clínicas de la microscopía confocal de reflectancia?

RCM se puede utilizar para diagnosticar benigno y maligno lesiones cutáneas, como:

• Melanoma, especialmente lentigo maligna
• Basal célula carcinoma
• Escamoso carcinoma celular

RCM se puede utilizar para controlar el tratamiento, como:

• Efectividad del imiquimod en actínico queratosis
• Evaluar los márgenes quirúrgicos apropiados ex vivo en la cirugía de Mohs

Un grupo de consenso determinó que las mejores indicaciones para el uso de RCM son (enero de 2017):

• Lesiones localizadas en cabeza y cuello, dañadas por crónico exposición al sol
• Lesiones tipificadas dermatoscópicamente por regresión
• Amelanótico Tumores.

El RCM también se puede usar para diagnosticar afecciones inflamatorias, como:

• Soriasis
• Dermatitis/eczema
• Infestaciones, por ejemplo, sarna.

¿Qué características se pueden ver en la piel normal usando RCM?

Estrato córneo

• los capa cachonda es una superficie altamente refractiva (brillante) rodeada de pliegues cutáneos visibles (estos son oscuros).
• Corneocitos son grandes (10–30 µm), poligonal y sin un visible núcleo.

Estrato granuloso

• Queratinocitos en el granular capa celular tiene biendemarcado contornos que forman un patrón de panal de miel.
• los citoplasma aparece blanco y granulado debido a orgánulos y gránulos de queratohialina.

Estrato espinoso

• Queratinocitos en el células escamosas capa son más pequeñas (15-25 µm), poligonales, tienen un citoplasma blanco delgado y un óvalo oscuro núcleos.
• También forman un patrón de panal de miel.

Estrato basal

• Las células basales son pequeñas (7 a 12 µm), de forma y tamaño uniformes y parecen más brillantes debido a la presencia de capas de melanina por encima de sus núcleos.
• Melanocitos y pigmentado los queratinocitos aparecen como estructuras redondas / ovales solitarias y son indistinguibles.
• En los fototipos de piel II a IV, los queratinocitos basales forman grupos de células redondas con queratinocitos altamente refractivos y muestran una apariencia de adoquines en las secciones confocales superiores.

Dermo-epidérmico cruce (DEJ)

• En el DEFJ, las pequeñas células basales y los melanocitos forman anillos brillantes que rodean la oscuridad. dérmico papilas
• Dentro de estos, pequeñas asas de capilares sanguíneos con vasos sanguineos Son vistos.
• Este arreglo se denomina un «borde papila”.

Dermis

• Los vasos sanguíneos de la dermis aparecen como estructuras tubulares oscuras que contienen células refráctiles débiles y brillantes.
• Colágeno las fibras aparecen como estructuras fibrilares alargadas y brillantes.

Características de RCM de las lesiones cutáneas

Melanoma

El melanoma temprano se caracteriza por:

• Alteración del DEJ, que se aplana y desordena
• Contornos papilares mal definidos (papila «sin bordes»)
• Papillas que se alternan con unicelulares proliferaciones y nidos de atípico células para formar un patrón «inespecífico».
• Papilas dérmicas que son reemplazadas por células atípicas.

Las características del melanoma más avanzado son:

• Células malignas que ocupan toda la unión.
• Células sueltas, grandes y brillantes dentro de la epidermis
• Células grandes y brillantes con núcleos excéntricos oscuros en la epidermis superficial (pagetoid propagar)
• Nidos cerebriformes en nodular melanoma

Melanocítico nevos

• Un patrón de malla está presente en su mayoría, correspondiente al componente de unión.
• Los nidos de unión aparecen como estructuras redondeadas bien delineadas, a veces conectadas a la epidermis.
• En nevos compuestos, una terrón Se observa patrón y corresponde a nidos dérmicos superficiales de melanocitos.

Queratosis benigna

• Una queratosis benigna se utiliza para describir un lentigo solar, un seborreico queratosis, una queratosis similar a un liquen plano o una combinación de estos.
• En la unión dermoepidérmica, hay un aumento en la densidad de las papilas dérmicas rodeadas por un brillante monomorfo capa de células.

Crédito. Dr. Manu Jain.

Figura 1. Imagen de RCM de una queratosis benigna en la unión dermoepidérmica muestra redonda a polimorfo papilas afiladas rodeadas por un borde de brillante monomorfo células (punta de flecha) y una córnea pseudoquiste (flecha).

Figura 2. Imagen RCM de un queratosis benigna en el suprabasal parte de la epidermis muestra un patrón de adoquines: células redondas brillantes, muy juntas, de tamaño y brillo uniformes, separadas por un contorno poligonal menos refractivo.

Carcinoma de células basales

Las características del carcinoma de células basales (BCC) son:

• Células compactas con periférico empalizada.
• los agrupado las celdas están delimitadas por un espacio oscuro
• A menudo están rodeados de vasos sanguíneos prominentes.

Carcinoma de células escamosas

Las características del carcinoma de células escamosas (SCC) son:

• Variable queratinocito atipia.
• Patrón de panal atípico y desorden arquitectónico de grado variable dentro del estrato granuloso y espinoso
• Vasos sanguíneos redondos que atraviesan las papilas dérmicas perpendiculares a la superficie de la piel Brillante escala–corteza en la superficie de la piel

Características de RCM de enfermedades inflamatorias

Las enfermedades inflamatorias se pueden agrupar en 4 categorías principales.

• Espongiótico dermatitis
• Psoriasiforme enfermedades
• Enfermedades con cambios de interfaz
• Pigmentario trastornos distintos de los tumores

Soriasis

Características de la crónica placa la psoriasis son:

• Papila no bordeada en la unión dermoepidérmica. Las papilas están rodeadas por anillos débiles de queratinocitos basales en lugar de anillos brillantes.
• Engrosamiento epidérmico
• Varios vasos dentro de las papilas sin borde

Dermatitis espongiótica

La dermatitis espongiótica se caracteriza por:

• Intercelular y intracelular La acumulación de líquido conduce a una apariencia regular en forma de panal.
• Espongiótico vesícula aparecen como espacios oscuros huecos entre la capa granular y espinosa
• Exocitosis se ve como células redondas y brillantes intercaladas entre los queratinocitos, alrededor de los vasos sanguíneos y anexos estructuras y en la dermis.

Limitaciones de RCM

En el microscopio confocal disponible comercialmente, la profundidad de la imagen es de 200 a 300 µm, que corresponde a la dermis papilar. Por lo tanto, las lesiones o procesos inflamatorios que son más profundos que eso no pueden evaluarse.

Otras limitaciones incluyen:

• No se puede diferenciar el spitzoide benigno lesión del melanoma en la mayoría de los casos.
• Las lesiones con abundante descamación pueden alterar la visualización de la unión dermoepidérmica.
• Requiere una amplia formación para interpretar imágenes.
• El instrumento puede ser voluminoso y difícil de colocar en pequeños sitios cóncavos, como el oído, el canto interno.