Que es indirecto immunofluorescentie?
La inmunofluorescencia indirecta, o inmunofluorescencia secundaria, es una t茅cnica utilizada en los laboratorios para detectar auto-antilichamen en paciente serum. Se usa para diagnosticar auto immuun enfermedades con ampollas.
- Sin etiquetar primair antistoffen (usado como marcador para kanker, diabetes y enfermedad de Alzheimer) del suero del paciente se unen al objetivo molecuul en muestras de tejido preparadas previamente.
- Anticuerpos secundarios (utilizados como marcador de hiv), conjugeren con un tinte fluorescente como el isotiocianato de fluoresce铆na (FITC), se unen al primario antilichaam.
- Cuando se expone a la luz, el tinte fluorescente se excita y emite una longitud de onda que se puede ver con un fluorescente. microscoop.
El tejido substraten usado (ya sea mono slokdarm o piel humana) depender谩 de la sospecha de enfermedad. Diferentes patrones de tinci贸n ayudar谩n a diagnosticar una enfermedad autoinmune. bulleus ziekte.
驴Para qu茅 afecciones cut谩neas con ampollas se realiza una prueba de inmunofluorescencia indirecta?
La inmunofluorescencia indirecta se utiliza para diagnosticar las siguientes enfermedades ampollosas autoinmunes:
- Pemphigus vulgaris
- pemphigus foliaceus
- Paraneoplastisch pemphigus
- immunoglobuline (Ig) Een pemphigus
- Lineair bulleus IgA huidziekte Y chronisch enfermedad bullosa de la infancia
- Dermatitis herpetiformis
- bulleuze pemfigo茂d
- pemfigo茂d tijdens de zwangerschap
- Slijm membraan pemfigo茂d
- Verworven epidermolysis bullosa
- bulleus systemisch lupus erythematosus.
El m茅todo de laboratorio
Preparaci贸n del suero del paciente para la prueba
- Se extraen y recolectan de 5 a 10 ml de sangre en un tubo.
- Se deja que la sangre coagule.
- Luego, la muestra de sangre se centrifuga para separar el suero del co谩gulo.
- El suero se divide en partes y se congela hasta el momento del an谩lisis.
La prueba de inmunofluorescencia indirecta
- El tejido se corta en rodajas de 4 a 6 micrones de grosor para el tejido. ondergrond portaobjetos (esto se puede hacer en un laboratorio, o los portaobjetos se pueden obtener comercialmente).
- Se preparan varios portaobjetos con diferentes sustratos de tejido.
- Las secciones de tejido se incuban con suero del paciente durante 30 minutos y se realiza una diluci贸n doble si Titels nodig.
- Los portaobjetos se lavan para eliminar los anticuerpos primarios no unidos.
- Los portaobjetos se incuban durante otros 30 minutos con anticuerpos secundarios que contienen un tinte fluorescente.
- Cada portaobjetos est谩 montado debajo de un cubreobjetos.
- Cada portaobjetos se examina mediante fluorescencia. microscopie.
Interpretaci贸n de los resultados de la inmunofluorescencia indirecta
Los portaobjetos inmunofluorescentes se examinan para determinar la presencia de autoanticuerpos a trav茅s de los patrones de inmunofluorescencia. uitspraak. Los resultados son subjetivos y la inmunofluorescencia indirecta no se puede utilizar de forma fiable para controlar la gravedad de la enfermedad y su tratamiento.
Los diferentes patrones de tinci贸n observados con inmunofluorescencia indirecta incluyen:
- Intercellulair patr贸n de tinci贸n espacial (ICS)
- Membrana basal zone (BMZ) patr贸n de tinci贸n.
La sensibilidad de una herramienta de diagn贸stico se refiere a su capacidad para identificar con precisi贸n a las personas con la enfermedad (es decir, producir un resultado positivo verdadero). La especificidad de una herramienta de diagn贸stico se refiere a su capacidad para identificar con precisi贸n a los que no tienen la enfermedad (es decir, producir un resultado negativo verdadero).
Ocasionalmente, una prueba tambi茅n puede producir resultados falsos. Por lo tanto:
- El resultado puede ser negativo incluso si el paciente tiene la enfermedad (es decir, produce un resultado falso negativo).
- El resultado puede ser positivo en un paciente sin la enfermedad (es decir, producir un resultado falso positivo).
Patrones inmunofluorescentes de enfermedades de la piel
Los patrones inmunofluorescentes observados en las siguientes enfermedades de la piel se describen a continuaci贸n.
Pemphigus vulgaris
En el p茅nfigo foli谩ceo, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- Un patr贸n de tinci贸n de ICS con dep贸sitos de IgG o C3
- Una sensibilidad del 81 al 87% [4,7]
- Una especificidad del 81% [7].
Pemphigus vulgaris
pemphigus foliaceus
En el p茅nfigo foli谩ceo, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- ICS IgG- of C3-patroon
- 60-86% [4,7].
pemphigus foliaceus
Paraneoplastische pemphigus
En el p茅nfigo, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- Anticuerpos C3 e IgG
- Una sensibilidad del 80% [3]
- Una especificidad del 83% [3].
bulleuze pemfigo茂d
En el penfigoide bulloso, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- Un patr贸n de tinci贸n lineal de BMZ con dep贸sitos de IgG y C3
- Una sensibilidad del 70% [3].
bulleuze pemfigo茂d
slijmvlies pemfigo茂d
En el penfigoide de la membrana mucosa, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- Un patr贸n de tinci贸n de BMZ con anticuerpos IgG o IgA
- Una sensibilidad del 20% [3].
pemfigo茂d tijdens de zwangerschap
En el penfigoide gestacional, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- Dep贸sitos C3
- Una sensibilidad del 93% [3].
Verworven epidermolysis bullosa
En la epiderm贸lisis ampollosa adquirida, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- Un patr贸n de tinci贸n lineal de BMZ con anticuerpos IgG
- Una sensibilidad del 50% [3].
Verworven epidermolysis bullosa
herpetiforme dermatitis
En la dermatitis herpetiforme, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- Anticuerpos anti-endomisio IgA
- Una sensibilidad del 80% [3].
Dermatosis ampollosa por IgA lineal y enfermedad ampollosa cr贸nica de la infancia
En la dermatosis ampollosa por IgA lineal y la enfermedad ampollosa cr贸nica de la infancia, la inmunofluorescencia indirecta muestra:
- BMZ con anticuerpos IgA
- Una sensibilidad del 50% [3].
Lupus eritematoso bulloso
En el lupus eritematoso ampolloso sist茅mico, la inmunofluorescencia indirecta muestra un patr贸n lineal de BMZ con anticuerpos IgG.
