Reflectie confocale microscopie

Wat is confocale reflectie? microscopie?

In dermatologie, reflectantie confocale microscopie (RCM) is dat nietinvasief beeldvormende techniek die in vivo visualisatie van de opperhuid naar de papillair dermis live. Resolutie is bijna vergelijkbaar met conventioneel histologie. Het heeft het voordeel dat de clinicus een "virtuele biopsie”Van de huid en verkrijg diagnostische aanwijzingen terwijl onnodige huid wordt geminimaliseerd biopsieën.

de confocale microscoop werd uitgevonden door professor Marvin Minsky in het midden van de jaren 1950. RCM op huidbeeldvorming werd later beschreven door Dr. melanoma en in opruiend huid condities.

Hoe werkt reflectantie confocale microscopie?

RCM gebruikt de diode Zijn als een monochromatische en coherente lichtbron.

• Het licht gaat door een straalsplitser, een optische scan- en focuslens en een huidcontactapparaat.
• Het dringt door de huid en verlicht een kleine weefselvlek.
• Licht gereflecteerd door de brandpunt De stip wordt gereflecteerd door de lens, die hem scherpstelt in een klein gaatje en een beeld vormt op een fotodetector.
• Het gaatje laat alleen licht van één brandpunt door (dwz het is confocaal) en voorkomt dat licht van een ander punt in het weefsel of uit een onscherp vlak er doorheen gaat.

RCM is gebaseerd op de reflectie (terugverstrooiing) van licht van structuren met endogeen tegenstelling, zoals melanine, hemoglobine en iets organellen. Reflectie vindt plaats aan de grenzen van twee structuren met verschillende brekingsindices, zoals membranen, keratohyaline korrels Y melanosomen.

De in de handel verkrijgbare Vivascope® 1500 gebruikt een laser van 830 nm, aangezien deze golflengte geen weefselbeschadiging aan de ogen van de patiënt of de bediener veroorzaakt. De indringdiepte is 200 tot 300 µm, wat over het algemeen overeenkomt met de papillaire dermis of hoger netvormig dermis.

Hoe wordt confocale reflectiemicroscopie gebruikt?

RCM is een pijnloze procedure.

• Een kleine hoeveelheid immersieolie wordt op de huid aangebracht (de brekingsindex van olie ligt dicht bij die van hoornlaag).
• Een glazen venster wordt aan een metalen ring bevestigd en over de olie geplaatst.
• Het glazen venster wordt met medische tape op de huid bevestigd om beweging van de huid te voorkomen.
• Een op water gebaseerd immersiemedium, bijvoorbeeld water of op waterbasis gel, wordt in de ring geplaatst, die magnetisch is bevestigd aan de optische lensbehuizing van de microscoop.

RCM maakt horizontaal scannen van beeldweefsel op een vooraf geselecteerde diepte mogelijk.

• Elke gegenereerde basisafbeelding is 5 mm x 5 mm. Alle verwondingen afbeeldingen tot 8 mm x 8 mm kunnen worden gegenereerd.
• De basisafbeeldingen worden door een computer samengevoegd tot een blok of mozaïek.
• Een verticale reeks afbeeldingen kan op dezelfde horizontale positie worden verkregen en wordt een stapel genoemd.
• Een kubus is een stapel blokken/tegels.

Het RCM-apparaat heeft een accessoire voor dermatoscoop. Dit maakt het mogelijk dermatoscopisch-correlatie van confocale microscopie. Video van capillair de bloedstroom kan ook worden gefilmd.

Wat zijn de mogelijke klinische toepassingen van confocale reflectiemicroscopie?

RCM kan worden gebruikt om een diagnose te stellen goedaardig Y kwaadaardige huidlaesies, zoals:

• Melanoom, vooral lentig kwaadaardig
• basaal cel carcinoom
• geschubd cel carcinoom

RCM kan worden gebruikt om de behandeling te volgen, zoals:

• Effectiviteit van imiquimod in actinisch keratose
• Beoordeel de juiste ex vivo chirurgische marges bij Mohs-chirurgie

Een consensusgroep bepaalde dat de beste indicaties voor het gebruik van RCM zijn (januari 2017):

• Gelokaliseerde hoofd- en neklaesies, beschadigd door chronisch blootstelling aan de zon
• Laesies dermoscopisch getypeerd door regressie
• amelanotisch Tumoren.

RCM kan ook worden gebruikt om ontstekingsaandoeningen te diagnosticeren, zoals:

• Psoriasis
• Dermatitis/eczeem
• Infestaties, bijv. Schurft.

Welke kenmerken kunnen worden gezien in de normale huid met behulp van RCM?

hoornlaag

• de geile laag het is een sterk brekend (helder) oppervlak omgeven door zichtbare huidplooien (deze zijn donker).
• corneocyten zijn groot (10–30 µm), veelhoekig en zonder zichtbaar kern.

korrelige laag

• keratinocyten in de korrelig cellaag blijft goed zittenafgebakend contouren die een honingraatpatroon vormen.
• de cytoplasma ziet er wit en korrelig uit door keratohyaline-organellen en korrels.

doornuitsteeksel

• Keratinocyten in de plaveiselcellen laag zijn kleiner (15-25 µm), veelhoekig, hebben een dun wit cytoplasma en een donker ovaal kernen.
• Ze vormen ook een honingraatpatroon.

basale laag

• Basale cellen zijn klein (7–12 µm), uniform van vorm en grootte, en lijken helderder door de aanwezigheid van lagen melanine over hun kernen.
• melanocyten Y gepigmenteerd keratinocyten verschijnen als solitaire ronde/ovale structuren en zijn niet van elkaar te onderscheiden.
• In huidfototypes II tot IV vormen basale keratinocyten ronde celclusters met sterk brekende keratinocyten en vertonen ze een geplaveid uiterlijk in de bovenste confocale secties.

Dermo-epidermaal kruising (DEJ)

• In JDEF vormen kleine basale cellen en melanocyten heldere ringen die het donker omringen. dermaal papillen
• Hierin zitten kleine lussen van bloedcapillairen met aderen Zijn gezien.
• Dit arrangement wordt een "edge" genoemd papil”.

huid

• De bloedvaten van de dermis verschijnen als donkere buisvormige structuren die heldere, zwakke refractiele cellen bevatten.
• collageen de vezels verschijnen als glanzende, langwerpige fibrillaire structuren.

RCM-kenmerken van huidlaesies

Melanoma

Vroeg melanoom wordt gekenmerkt door:

• Wijziging van de DEJ, die afgeplat en ongeordend is
• Slecht gedefinieerde papillaire contouren ("randloze" papilla)
• Papilla's die worden afgewisseld met eencellig proliferaties en nesten van atypisch cellen om een "niet-specifiek" patroon te vormen.
• Dermale papillen die worden vervangen door atypische cellen.

De kenmerken van het meest geavanceerde melanoom zijn:

• Kwaadaardige cellen die de hele kruising bezetten.
• Losse, grote, glanzende cellen in de opperhuid
• Grote, heldere cellen met donkere excentrische kernen in de oppervlakkige epidermis (paginatoïde spreiding)
• Cerebriform nestelt zich in nodulair melanoma

melanocytisch nevi

• Een maaspatroon is meestal aanwezig, overeenkomend met de bindende component.
• Attachment nidus verschijnen als goed afgebakende afgeronde structuren, soms verbonden met de epidermis.
• In samengestelde naevi, a klont Er wordt een patroon waargenomen dat overeenkomt met oppervlakkige dermale nesten van melanocyten.

goedaardige keratosen

• Een goedaardige keratose wordt gebruikt om een solar lentigo, a seborroïsch keratose, een lichen planus-achtige keratose of een combinatie hiervan.
• Bij de dermoepidermale overgang is er een toename in de dichtheid van de dermale papillen omgeven door een heldere monomorfisch cel laag.

Credit. Dr Manu Jain.

Figuur 1. RCM-beeld van een goedaardige keratose op de dermo-epidermale overgang, rond monster a polymorf scherpe papillen omgeven door een rand van glanzend monomorfisch cellen (pijlpunt) en een hoornvlies pseudocyste (pijl).

Figuur 2. RCM-afbeelding van een goedaardige keratose in de suprabasaal een deel van de epidermis vertoont een geplaveid patroon: dicht op elkaar gepakte, heldere ronde cellen van uniforme grootte en helderheid, gescheiden door een minder brekende veelhoekige omtrek.

Basaalcelcarcinoom

De kenmerken van basaalcelcarcinoom (BCC) zijn:

• compacte cellen met perifere palissade.
• de gegroepeerd de cellen worden begrensd door een donkere ruimte
• Ze zijn vaak omgeven door prominente bloedvaten.

Plaveiselcelcarcinoom

Kenmerken van plaveiselcelcarcinoom (SCC) zijn:

• Variabel keratinocyten atypie.
• Atypisch honingraatpatroon en architecturale stoornis van variabele graad binnen de granulaire en spinosuslaag
• Ronde bloedvaten die loodrecht op het huidoppervlak door de dermale papillen lopen Glanzend schaal–schors op het huidoppervlak

RCM-kenmerken van ontstekingsziekten

Ontstekingsziekten kunnen worden gegroepeerd in 4 hoofdcategorieën.

• sponsachtig dermatitis
• psoriasiform ziekten
• Ziekten met interfaceveranderingen
• Pigmentair andere aandoeningen dan tumoren

Psoriasis

Kenmerken van de kroniek nummerplaat psoriasis zijn:

• Onbegrensde papilla op de dermoepidermale kruising. De papillen zijn omgeven door vage ringen van basale keratinocyten in plaats van heldere ringen.
• epidermale verdikking
• Verschillende vaten binnen randloze papillen

spongiotische dermatitis

Spongiotische dermatitis wordt gekenmerkt door:

• Intercellulair Y intracellulair Vloeistofophoping leidt tot een regelmatig honingraatachtig uiterlijk.
• sponsachtig galblaas verschijnen als donkere holle ruimten tussen de granulaire en spinosus laag
• exocytose gezien als ronde, glanzende cellen verspreid tussen keratinocyten, rond bloedvaten en bijlagen structuren en in de dermis.

RCM-beperkingen

In de in de handel verkrijgbare confocale microscoop is de beelddiepte 200 tot 300 µm, wat overeenkomt met de papillaire dermis. Daarom kunnen laesies of ontstekingsprocessen die dieper zijn dan dat, niet worden geëvalueerd.

Andere beperkingen zijn onder meer:

• Kan goedaardige spitzoïde niet onderscheiden blessure melanoom in de meeste gevallen.
• Laesies met overvloedige desquamatie kunnen de visualisatie van de dermoepidermale overgang veranderen.
• Vereist uitgebreide training om afbeeldingen te interpreteren.
• Het instrument kan omvangrijk zijn en moeilijk te plaatsen in kleine concave plaatsen, zoals het oor, de binnenhoek.